摘要：帕金森病（PD）的干細胞替代療法雖前景廣闊，但移植后多巴胺能（DA）神經元極低的存活率（>90%的丟失）嚴重阻礙其療效。本文聚焦于這一核心挑戰，綜述了近期突破性研究揭示的細胞死亡關鍵機制——TNFα-NFκB-p53信號軸，并提出了兩項核心解決方案：
- 1）短期使用臨床批準的TNFα抑制劑（如阿達木單抗）?以阻斷該死亡通路；
- 2）利用特定細胞表面標志物（CD49e^low/CD184^high）進行無基因工程化的DA神經元純化，以消除非目標細胞帶來的風險。
這兩大策略相輔相成，為提升移植細胞存活率、推動PD細胞療法走向安全有效的臨床轉化提供了明確路徑。
干細胞治療帕金森病：提高人干細胞源多巴胺能神經元存活率的兩種方法
帕金森?。≒D）作為第二常見的神經退行性疾病，其核心病理特征是中腦黑質多巴胺（DA）能神經元的進行性退化，導致運動功能嚴重受損?，F有藥物如左旋多巴僅能對癥治療，無法逆轉疾病進程?；谌硕嗄芨杉毎╤PSC，包括胚胎干細胞和誘導多能干細胞）的細胞替代療法，旨在通過移植新的DA神經元從根本上恢復神經環路功能，被視為極具前景的治愈性策略，并已進入臨床試驗階段。
然而，該療法的轉化面臨嚴峻挑戰。其中最突出的是移植后DA神經元的存活率極低，超過90%的細胞在移植后死亡，導致療效不穩定且不可預測。同時，移植產物中混雜的非DA細胞（如血清素能神經元）可能引發移植物誘導的運動障礙等副作用。因此，如何提高移植DA神經元的存活率并確保產物純度，成為領域內亟待解決的核心科學問題。
核心挑戰剖析：移植神經元為何大量死亡？
近期研究為揭示細胞死亡機制帶來了突破。Kim等人（2024）利用體內CRISPR-Cas9篩選技術發現，腫瘤抑制蛋白p53是限制移植后DA神經元存活的關鍵因子（圖1）。這一發現與PD病理中p53水平升高的現象相吻合。進一步研究發現，在移植早期，腫瘤壞死因子-α（TNFα）?通過激活核因子κB（NFκB）信號，進而上調并激活p53，最終啟動DA神經元的程序性死亡。值得注意的是，這種TNFα不僅來源于宿主免疫反應，移植的DA神經元自身也會表達TNFα，形成一種自我限制的“細胞自主性死亡”環路。
解決方案一：靶向死亡通路——短暫抑制TNFα信號
既然TNFα-NFκB-p53軸是導致死亡的關鍵通路，抑制該通路就成為提高存活率的直接策略。研究表明，在移植后關鍵窗口期，短期使用臨床已廣泛應用的TNFα抑制劑（如阿達木單抗），能顯著提高臨床前動物模型中移植DA神經元的存活率，并伴隨運動功能的改善。
此策略的優勢在于：
- 1）轉化速度快：阿達木單抗等藥物安全性已知，“老藥新用”可大幅縮短研發周期；
- 2）治療窗口明確：僅在移植前后短期給藥，即可有效阻斷早期死亡潮，避免長期免疫抑制的潛在風險。
解決方案二：優化移植細胞產品——無基因標記的DA神經元純化
提高存活率不僅需要“救活”細胞，還需從源頭優化移植細胞本身。傳統依賴遺傳報告基因（如NURR1-GFP）的純化方法因涉及基因工程而不適于臨床。為解決此問題，研究者通過篩選鑒定出一組細胞表面標志物組合：CD49e (低表達) 和 CD184 (高表達)。利用流式細胞術分選該標志物陽性的細胞，即可在不進行基因改造的前提下，高效富集到高純度的、有絲分裂后的DA神經元。
這一純化策略的意義重大：
- 1）臨床兼容性好：適用于任何hPSC/iPSC系，為自體或異體治療提供了通用方案；
- 2）提升安全性與療效：去除非目標細胞，降低了運動障礙等副作用風險，并可能富集對PD治療至關重要的、易受損的A9亞型DA神經元；
- 3）保證產品一致性：為標準化細胞制劑生產奠定了基礎。
臨床轉化前景與綜合應用
將上述兩大策略——圍移植期短期TNFα抑制與移植前基于表面標志物的DA神經元純化——相結合，構成了一個協同增強的解決方案。前者為移植細胞創造了初始生存窗口，后者則提供了最優化的“種子”細胞。
這一策略的價值不僅限于PD。TNFα介導的炎癥性死亡是許多細胞移植面臨的共性障礙，因此該方案為其他疾病的細胞治療（如視網膜細胞治療黃斑變性、胰島細胞治療糖尿?。┨峁┝酥匾獏⒖肌４送?，流行病學數據提示，長期使用TNFα抑制劑的患者PD發病率降低，暗示該策略可能對原生神經元也有保護作用，或有利于移植物的長期整合。
未來展望與待解問題
盡管前景光明，仍有諸多問題有待探索：
首先，TNFα抑制僅解決了約30%的細胞死亡，其余死亡機制（如移植過程中的缺氧應激）需要進一步闡明。
其次，需要優化TNFα抑制劑的最佳給藥方案（時機、劑量、療程）。
最后，探索將上述策略與神經營養因子輸送、或與具有免疫調節功能的細胞（如調節性T細胞）共移植等聯合方案，有望進一步優化移植微環境，實現存活率的階梯式提升。
結論
綜上所述，通過精準解析移植后DA神經元死亡的核心通路（TNFα-NFκB-p53軸），并據此開發出藥理學干預與細胞產品工程化的雙軌策略，我們為突破帕金森病干細胞療法存活率低的瓶頸提供了清晰、可轉化的路徑。這些進展不僅推動了PD細胞治療向臨床現實邁進，也為整個細胞替代治療領域樹立了攻克移植存活難題的典范。
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