干細(xì)胞移植通過三種方式治療1型糖尿病的案例研究

近日，印度Jawale醫(yī)院在《Ann Med Surg (Lond)》雜志上面發(fā)表一篇文章，報道了干細(xì)胞治療1型糖尿病，將干細(xì)胞移植到網(wǎng)膜袋、腹膜和血液中的臨床實(shí)驗(yàn)研究。患者經(jīng)過干細(xì)胞移植治療一年后的平均體重增加、每日胰島素需求量及其治療后下降、HbA1c水平下降、空腹和餐后血糖下降、C肽水平上升和Anti-GAD下降測量了抗體滴度，發(fā)現(xiàn)其具有臨床應(yīng)用價值。

簡介

1型糖尿病是一種可怕的兒童自身免疫性疾病，在印度的發(fā)病率為0.26/1000。目前胰島素注射和胰島細(xì)胞移植是FDA批準(zhǔn)的治療方法。每天注射多次胰島素及其費(fèi)用對于大多數(shù)孩子來說都是無法接受的。胰島細(xì)胞移植成本過高，只能緩解2-5年。

醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中有許多有前途的動物和發(fā)表的體外研究，其中干細(xì)胞在糖尿病大鼠中建立了正常血糖。為了1型糖尿病患者的福利，我們需要將動物研究的結(jié)果帶給人類。需要開發(fā)一種新的、廉價且有效的方法來治療這種疾病。通過不同的途徑將干細(xì)胞植入身體的不同部位有不同的好處。因此，我們發(fā)明了用于1型糖尿病的自體骨髓干細(xì)胞療法，將干細(xì)胞移植到網(wǎng)膜袋、腹膜和血液中，使患者受益于所有3種方法。Omental pouch手術(shù)在醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中首次報道。

材料和方法

近5年來我用自體干細(xì)胞療法治療了21例1型糖尿病患者，同期將26例常規(guī)注射胰島素治療的1型糖尿病患者作為對照組。空腹血糖和餐后血糖、抗Gad抗體滴度、糖基化Hb和C肽水平以及患者體重和24小時內(nèi)的總胰島素需求是治療前和治療后要測量的變量。從患者自身的骨髓中采集干細(xì)胞，并通過密度梯度法分離。

干細(xì)胞移植方式

在移植干細(xì)胞前1小時開始靜脈輸注20mg/kg甲潑尼龍溶解在 100 mL生理鹽水中。移植細(xì)胞的平均數(shù)量為7.86×107。三分之一數(shù)量的分離干細(xì)胞通過1號放入Omental袋中。另外三分之一進(jìn)入腹膜腔。剩余的三分之一在100毫升生理鹽水中靜脈注射。

結(jié)果

最短隨訪時間為6個月，最長為4年。花了3個月才看到結(jié)果。父母每天通過血糖儀定期監(jiān)測血糖水平，并由患者的醫(yī)生相應(yīng)地調(diào)整胰島素劑量。空腹血糖和餐后血糖、抗Gad抗體滴度、糖基化Hb和C肽水平、患者體重和每日總胰島素需求量是要比較的變量。這些參數(shù)在治療前和治療后每3個月檢查一次。臨床結(jié)果在治療后一年結(jié)束時完全表達(dá)。因此，上述變量在治療日期后一年結(jié)束時進(jìn)行比較（表格1)。

中間部分?jǐn)?shù)據(jù)省略，可后臺留言獲取

一些患者由于負(fù)擔(dān)不起、缺乏動力、當(dāng)?shù)鼐幼〉貐^(qū)缺乏可用性等各種原因而沒有每3個月發(fā)送一次調(diào)查報告。體重增加是1型糖尿病的重要預(yù)后指標(biāo)。測量兩組治療前和治療后一年的體重。在治療組中，治療后平均體重增加約16%，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01（圖A)。對照組平均增重僅為2.23%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖B)。

一年結(jié)束時，治療組中有3名 (14.28%) 患者停用胰島素，直到治療后三年才停用胰島素。其余19名 (85.72%) 患者平均胰島素需求量在治療一年后下降了51.68%，差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上非常顯著，P<0.01 (圖C)。在對照組中，沒有患者停用胰島素，只有13.2% 患者的胰島素需求量比之前低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖D). 58.6% 的患者胰島素需求量與之前相同，28.2%的患者胰島素需求量高于之前。

HbA1c水平在治療組中平均下降了35.78%，差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上非常顯著，P<0.01（圖E). 對照組平均降幅僅為8.2%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖F), 62.6%的患者水平相同，29.2%的患者水平高于之前。

治療組空腹血糖平均下降42.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P < 0.01（圖G). 對照組空腹血糖平均下降8.1%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖H). 59.3%的患者空腹血糖相同，32.6%的患者餐后血糖水平較高。

治療組餐后血糖平均下降50.93%，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P < 0.01（圖一)。對照組餐后血糖水平平均下降13.1%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖J)。5.3%的患者餐后血糖水平相同，31.6%的患者餐后血糖水平較高。

治療組C肽水平平均升高89%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01（圖表K)。在對照組中，C肽水平平均增加了11.1%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖L)。65.1%的患者C肽水平相同，23.8%的患者C肽水平較高。

在治療組中，6名患者的抗GAD抗體滴度高于正常水平，一年內(nèi)下降至約67%，表明自身免疫部分逆轉(zhuǎn)（圖M)。在對照組中，有11名患者的Anti-GAD抗體滴度高于正常水平，其中只有13.8%的患者在一年結(jié)束時水平較低（圖N)。

干細(xì)胞治療后發(fā)現(xiàn)了一些副作用，但它們在很大程度上是自限性的，而且本質(zhì)上是輕微的。3名患者（14.2%）有輕度皮疹，未經(jīng)任何治療自行消失。5名患者 (23.8%) 出現(xiàn)術(shù)后疼痛，使用單劑量雙氯芬酸鈉注射液鎮(zhèn)痛后疼痛完全消失。2名患者 (9.5%) 有輕度惡心，無需任何治療。

討論

今天有證據(jù)表明，骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞可以轉(zhuǎn)分化為胰島樣細(xì)胞，在體外產(chǎn)生胰島素。這就是靜脈注射干細(xì)胞的基本原理。由于胰腺釋放的特定生長因子，這些細(xì)胞中有許多可以到達(dá)胰腺并分化成胰島樣細(xì)胞。通過靜脈注射干細(xì)胞，可以通過間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能逆轉(zhuǎn)自身免疫。

與對照組相比，治療組的效果非常好（表格1)。空腹血糖和餐后血糖、抗Gad抗體滴度、糖基化Hb和C肽水平、患者體重以及治療前后的每日總胰島素需求量是要比較的變量。上述變量的差異是在一年結(jié)束時計(jì)算治療前后的差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該療法在逆轉(zhuǎn)自身免疫方面取得了部分成功。在沒有自身免疫力的兒童中獲得了最好的結(jié)果。具有自身免疫力的患者結(jié)果相對較差。

一年后只有一名患者重復(fù)治療。干細(xì)胞被植入腹膜和血液中。相比之下，他的變量進(jìn)一步提高了25-30%。盡管一個患者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上不顯著，但我們需要一系列有更多患者重復(fù)治療及其結(jié)果的系列。現(xiàn)階段我們可以希望更多的患者可以通過間隔多次重復(fù)治療，實(shí)現(xiàn)血糖正常和胰島素獨(dú)立。

結(jié)論

將干細(xì)胞移植到網(wǎng)膜袋、腹膜和血液中的1型糖尿病自體干細(xì)胞療法對于1型糖尿病的長期治療是安全且有效的。它還部分逆轉(zhuǎn)了自身免疫。我們需要更多的案例和更長時間的跟進(jìn)才能讓它變得更好。該療法為1型糖尿病患者帶來了很多希望，因?yàn)樗梢院苋菀椎刂貜?fù)多次。

參考資料：Jawale S. Stem cell therapy for type1 diabetes with transplantation of stem cells into the Omental pouch, peritoneum, and blood, experimental study. Ann Med Surg (Lond). 2022 Aug 27;81:104468. doi: 10.1016/j.amsu.2022.104468. PMID: 36147094; PMCID: PMC9486716.