間充質干細胞（Mesenchymal Stem Cells，簡稱MSC）是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的多能成體干細胞。它們源自中胚層，可以分化成多種細胞類型，包括軟骨細胞、脂肪細胞、成骨細胞等。

如何識別間充質干細胞？

間充質干細胞是具有自我更新能力和來源于中胚層的多能成體干細胞。對于體外培養(yǎng)的間充質干細胞的識別，通常可以通過以下三條標準進行驗證：

一、細胞形態(tài)學觀察

間充質干細胞多數(shù)呈纖維細胞樣生長，少量呈梭形或不規(guī)則三角形。可運用組織塊貼壁法、酶消化法以及兩種方法的結合分離出MSC，通過傳代培養(yǎng)后，幾乎所有的MSC都具備貼壁生長的能力，并且具有較強的貼壁能力。

二、表面標志物鑒定

間充質干細胞屬混雜細胞群，其表面抗原也具有非專一性，可同時表達間質細胞、內皮細胞和表皮細胞的表面標志，如粘附因子、生長因子和細胞因子受體以及整合素家族等。MSC的細胞表面標志物鑒定標準為：

• 陽性表達：CD105、CD73和CD90的陽性率應大于等于90%。
• 陰性表達：CD45、CD34、CD14、CD19和HLA-DR應呈陰性，陽性率小于等于5%。

需要注意的是，陽性標記不具特異性，并非每個MSC都同時表達CD105、CD73和CD90。在鑒定過程中，可采用流式細胞儀對MSC的細胞表型進行準確鑒定。

三、多向分化潛能鑒定

間充質干細胞具有分化為多種細胞類型的能力，如軟骨細胞、脂肪細胞、成骨細胞等。通過特異性染色可以鑒定體外成脂、成骨和成軟骨誘導后的分化能力：

• 成脂誘導分化鑒定：細胞成脂分化誘導2周左右，在倒置顯微鏡下觀察可見細胞質內出現(xiàn)油滴，經油紅O染色后為紅色。
• 成骨誘導分化鑒定：細胞成骨分化誘導3周左右時，在倒置顯微鏡下觀察可見不透明區(qū)域，經茜素紅染色后可見密集的紅色沉淀物呈結節(jié)狀。
• 成軟骨誘導分化鑒定：細胞成軟骨分化誘導2周左右，在倒置顯微鏡下觀察可見細胞經阿利新藍染色為淡藍色。

綜上所述，通過細胞形態(tài)學觀察、表面標志物鑒定以及多向分化潛能鑒定這三條標準，可以較為準確地識別間充質干細胞。同時，這些鑒定方法也為間充質干細胞的研究和應用提供了重要的參考依據(jù)。

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